- 厂家供应
- 大量现货
- 可开发票
服务热线：
13636495876
服务热线：
13636495876
产品分类
Products
更新时间：2013-01-08 
浏览次数：1762
详细资料：
图片：
开始之前 请阅读完整的手册，以熟悉的EZgene TM 96孔的血液DNA试剂盒过程。1。准备一个足够的的洗脱缓冲和分装成部分的蛋白酶K原液。存储每个等分试样在-20℃下，在使用前解冻。每个样品，将要求25μL该溶液。升 GD2815-00溶解洗脱缓冲液2.5毫升升 GD2815-01与10 mL的洗脱缓冲液溶解升 GD2815-02溶解50.0毫升洗脱缓冲液2。如下，储存在室温下用无水乙醇稀释DNA浓缩洗涤缓冲液。升 GD2815-00加入160毫升（96％-100％）乙醇升 GD2815-01加入640毫升（96％-100％）乙醇升 GD2815-02加入乙醇，每瓶640毫升（96％-100％）3。预热洗脱缓冲液在65℃下4。调整到250μL的样品的体积。小于250μL的样品，加入适当体积的PBS 250μL。对于大于250μL的样品，每个样品拆分成两个取250μL，并使用1.2 mL圆底孔板溶解的两口井。到96孔DNA板的各孔中装入合并的溶胞产物。 储存的血液样本没有以前的治疗的血液样本的存储导致产量减少的基因组DNA。的结果，血标本应作如下处理，l对于短期存储（一个星期），在含有EDTA抗凝管收集血液，并储存于4°C。l对于长期储存，收集管中的血液中含有一种抗凝血剂，并储存在-70°C。解冻冷冻血液样本，在37°C，使用前轻轻搅拌。 EZgene TM 96 - 井血液DNA协议 1。免除25 μL 蛋白酶K（20 毫克/毫升），每孔1.2 mL圆底孔板的底部。每个样品标记的位置。2。井的内部，而不接触轮辋与前端部（zui多6 x 10 6淋巴细胞或培养的细胞在PBS中可以通过触摸到圆形孔深孔板的各孔中添加250μL的全 血，血清或体液各孔中使用）。注：样品体积小于或大于250μL，调整样品体积250μL PBS（开始之前第4页上的详细信息，请参阅“）。3。每个样品中加入250μL缓冲液BL。避免接触的轮辋井的提示，这可能会导致交叉污染。可选：添加5μL的核糖核酸酶A每口井每250μL 缓冲液BL。添加缓冲BL /核糖核酸酶A组合，以每口井。4。密封圆形孔板上限（提供）*混合样品，振荡30秒或用力摇动板（边到边）。注意：摇动机架一侧到另一侧。为了防止可能出现的泄漏周围微管帽，不摇板和失望。5。在2000 XG短暂离心收集任何样本，帽子。6。孵育样品在65℃的培养箱中或烤箱10分钟。混合孵化过程中偶尔轻轻地旋转板。注意：切勿剧烈振荡的样品超过20分钟。7。在2000年XG短暂离心收集任何解决方案，从帽。取出微管帽。向每孔中加入2 6 0μL 的无水乙醇（96-100％） 。8。密封圆形孔板使用新上限（提供）。9。将样品混合，通过涡旋或用力摇动1分钟的板（从一侧到另一侧）。在2000年XG短暂离心收集任何液体的上限。10。将DNA板顶部的2毫升96孔收集板（提供）。马克的96孔DNA板，以便后面识别。11。传输从步骤10到96孔DNA板的各孔中的所有样品。12。用密封膜密封的96孔DNA板。离心在5000 XG 5-10分钟。确保所有的样品已通过膜的DNA板的各孔中。13。丢弃流过的96孔收集板。删除的粘合膜的盖子，然后在各孔中添加400μL缓冲液KB。14。密封板与新的密封膜，并在5000×g离心5分钟，然后离心处理，以使板。丢弃流过的96孔收集板。15。取出的密封膜的盖子，然后在各孔中添加700μLDNA洗涤缓冲液。注：即DNA洗涤缓冲液浓缩物和被提供作为瓶或第4页上所示，必须用无水乙醇稀释。如果是冷藏保存，稀释的洗涤缓冲液必须冷却至室温后再使用。16。密封板与新的密封膜，并在3000-5000 xg离心5分钟，然后离心处理，以使板。丢弃的流量，通过在96孔收集板。17。卸下粘接膜盖和在各孔中添加600μLDNA洗涤缓冲液。将DNA的2毫升收集板的顶部板96孔，96孔DNA板密封与 ??一个新的密封膜和离心机在马克西速度（5,000 xg离心）10分钟。18。取出的密封膜，并在真空烘箱中或在70℃的培养箱预置为8分钟，干燥膜孵育96孔DNA板。注意：这些干燥步骤用于除去的微量乙醇，否则可能会干扰与下游应用是至关重要的。19。将96孔DNA板之上的新的安装机架的微管（附带）。添加200μL洗脱缓冲液在65℃下预热96孔DNA板的各孔中。两到四分钟，在室温下孵育，或在孵化器设定在65℃的一到两分钟。20。与一个新的密封膜密封96孔DNA板和离心处理，以使板在5,000 xg离心5分钟，以洗脱DNA。注： *次洗脱通常会产生60％-70％的DNA绑定到列。另外200μL洗脱缓冲液可以产生另外的20％。 低于50μL的卷，大大降低了产量。
我的位置：